血?dú)夥治雠c酸堿指標(biāo)測(cè)定是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常涉及到的一項(xiàng)重要技術(shù)方法。血液氧分壓、二氧化碳分壓和PH值是血?dú)夥治龊退釅A指標(biāo)測(cè)定的三個(gè)主要項(xiàng)目,血?dú)夥治龊脱篜H測(cè)定組成一個(gè)分析系統(tǒng),通常統(tǒng)稱為血?dú)夥治觯╝nalysis of blood gas)。樣品血?dú)夥治龊脱簆H測(cè)定主要由全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x來(lái)完成。血?dú)夥治鰞x可以測(cè)定機(jī)體通氣功能,通氣與血流比值及彌散等肺功能,也能測(cè)定組織的氧代謝、氧耗及血液的氧合。血?dú)夥治鰞x的工作原理和構(gòu)造在第六章第一節(jié)中將有詳細(xì)介紹。血?dú)夥治鰞x測(cè)定的主要指標(biāo)為pH、PO2和PCO2,有些儀器還能測(cè)定血紅蛋白和血鉀濃度。根據(jù)主要參數(shù)可推算出(或通過儀器計(jì)算)其他指際;標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽(SBlack Eye、實(shí)際碳酸氫鹽(ABlack Eye、緩沖堿(BBlack Eye、剩余堿(BE)、血氧飽和度(SAT)和血氧含量(O2CT)等。
(一)采集血液樣品時(shí)的注意事項(xiàng)影響血?dú)鉁y(cè)定結(jié)果的因素較多,除儀器本身性能及其標(biāo)準(zhǔn)液的制備、環(huán)境溫度、氣壓、體溫外,標(biāo)本采集與處理對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性影響也極大,因?yàn)椴杉c處理不當(dāng)而引起的誤差往往遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于分析的誤差。因此,血液標(biāo)本采集時(shí)要注意以下幾點(diǎn):
1.保持動(dòng)物處于安靜狀態(tài)使動(dòng)物處于安靜狀態(tài)是標(biāo)本采集中的一個(gè)重要條件,因?yàn)榧词故嵌虝旱钠翚饣蚣贝俸粑紩?huì)使測(cè)定結(jié)果發(fā)生異常。必要時(shí),可實(shí)施局部麻醉。
2.動(dòng)脈的選擇穿刺部位應(yīng)選擇粗大、表淺、易于觸及且周圍無(wú)大靜脈伴行(避免誤取靜脈血)的動(dòng)脈,如兔的耳中央動(dòng)脈。股動(dòng)脈雖是一個(gè)良好的穿刺部位,但其側(cè)支循環(huán)不良,而且有股靜脈伴行,應(yīng)慎之。
3.厭氧環(huán)境血?dú)夥治鲋械难獦颖緩?qiáng)調(diào)采用密閉式的方式進(jìn)行動(dòng)脈采血。玻璃注射器必須密封不漏氣(不用石蠟油,而只需用少量的肝素抗凝劑將針管和針?biāo)?rùn)濕)。采血后,應(yīng)立即用橡皮帽將針頭封閉。血標(biāo)本內(nèi)不應(yīng)有氣泡混入。因?yàn)闅馀莸拇嬖跁?huì)明顯地降低血標(biāo)本的PCO2,而且會(huì)使PO2值與空氣的PO2值(19.95kPa)接近。血標(biāo)本中混入的空氣越多,產(chǎn)生的誤差就越大。
4.抗凝劑肝素鈉是惟一可用的抗凝劑。肝素鈉溶液PH約為7.0。1000U/ml或10mg/ml的肝素鈉0.05ml足以抗凝1ml全血。若用肝素鈉溶液吸入5ml注射器后排出,則注射器針管與針頭的死腔里殘留的肝素鈉溶,足夠使5ml血液抗凝。而且對(duì)血液的稀釋因素可以忽略不計(jì)。
5.標(biāo)本的貯存采集的血標(biāo)本若不能在10分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,應(yīng)立即將標(biāo)本放入冰水中,使其溫度在15分鐘內(nèi)降至0℃~ 4 ℃,以便貯存和運(yùn)送。血液標(biāo)本置于4 ℃環(huán)境中,其PH值在1小時(shí)內(nèi)變化不大,PO2和PCO2值在2小時(shí)內(nèi)幾乎沒有變化:在37 ℃環(huán)境中,PO2每小時(shí)下降0.63±0.65kPa,PCO2每小時(shí)增加0.11±0.13kPa。血際本存放處溫度越高,存放時(shí)間越長(zhǎng),則pH和PO2下降越多,PCO2升高也越大。原因是有核白細(xì)胞進(jìn)行耗氧代謝的結(jié)果(成熟紅細(xì)胞無(wú)需有氧代謝)。
(二)血液樣品采集方法用2ml清潔注射器連接針頭抽取肝素生理鹽水溶液(300μl/ml)少許,充分浸濕管壁,針頭朝上排盡氣體及多余的肝素溶液,使注射器及針頭的所有死腔內(nèi)仍充滿肝素溶液即可。肝素過多易稀釋血液,引起結(jié)果不準(zhǔn)確。然后操作者可根據(jù)不同類型的儀器,從動(dòng)脈采集血樣0.5ml~1.0ml(小動(dòng)物也可用容量為90祃的毛細(xì)玻璃管采血),注意血樣內(nèi)切勿混入氣泡,針頭拔出后,立即將針頭刺入一橡皮塞內(nèi),以保證血樣內(nèi)不進(jìn)入空氣。將注射器在掌內(nèi)來(lái)口搓動(dòng)10次左右,使血樣與肝素混合,貼上標(biāo)簽及注明體溫后盡快送檢。
(三)血液樣品的測(cè)定方法全自動(dòng)血?dú)夥治鰞x是微機(jī)控制的自動(dòng)化儀器,其操作程序比較簡(jiǎn)單,只要按照儀器操作說明書進(jìn)行操作,將動(dòng)脈血注入進(jìn)樣口,當(dāng)血液到達(dá)電極組合通道上方的液敏傳感器時(shí),儀器便停止接收樣品,并開始分析測(cè)定。測(cè)定10余項(xiàng)參數(shù)只需要大約一分鐘的時(shí)間。
動(dòng)脈血?dú)夥治鋈椒?nbsp;
簡(jiǎn)單地講,三步法包括:第一步,病人是否存在酸中毒或堿中毒?第二步,酸/堿中毒是呼吸性還是代謝性?第三步,如果是呼吸性酸/堿中毒,是單純呼吸因素,還是存在代謝成分?
血?dú)夥治龊?jiǎn)易方法酸堿平衡的分析對(duì)很多同學(xué)來(lái)說很難,最近看到一個(gè)很簡(jiǎn)便易記的分析方法,推薦給大家,希望對(duì)大家有所幫助。
本方法為三步分析法。
(1)先看pH. 升高說明堿中毒,降低說明酸中毒。
(2)再看PaCO2 若是pH和PaCO2同向變化(即pH升高,PaCO2也升高,反之亦然),則是呼吸性的,若異向變化,則是代謝性的。
(3)若是呼吸性的,則應(yīng)分析是否為單純性的還是混合性的。正常pH7.40+/-0.05,正常PaCO2是40+或—5mmHg。一般PaCO2變化10mmHg,pH變化0.08,經(jīng)過計(jì)算可得理論pH(常有+或-0.02的波動(dòng)),與實(shí)際測(cè)得pH比較便可知是否單純性或混合有代謝性。
例如:PaCO2為50mmHg,pH為7.49,首先判斷為堿中毒,PaCO2與pH同向變化,故為呼吸性堿中毒。PaCO2增加10,則pH增加0.08+或-0.02,為7.48+或-0.02。測(cè)得值在該范圍內(nèi),故是單純呼吸性堿中毒。若是測(cè)得值在該范圍上限之上,說明合并了代謝性堿中毒,若是在該范圍下限之下,說明合并代謝性酸中毒。
經(jīng)過(2)確定是代謝性的酸堿中毒,一般則沒有必要分析第三步了,因?yàn)榕R床上代謝性酸堿中毒合并呼吸性酸堿中毒很少見的 。
具體方法如下:
第一步,看PH值,正常值為7.4±0.05。PH≤7.35為酸中毒,PH≥7.45為堿中毒。
第二步,看PH值和PCO2改變的方向。同向 改變(PCO2增加,PH值也升高,反之亦然)為代謝性,異向改變?yōu)楹粑浴?/div>
第三步,如果是呼吸性的,再看PH值和PCO2改變的比例。正常PCO2為40±5mmHg,單純呼吸性酸/堿中毒,PCO2每改變10mmHg,則PH值反方向改變0.08±0.02。 例如,如果PCO2是30mmHg(降低10mmHg),那么PH值應(yīng)該是7.48(增加0.08);如果PCO2為60mmHg(增加20mmHg),則PH值應(yīng)為7.24(降低2×0.08)。
如果不符合這一比例,表明還存在第二種因素,即代謝因素。這時(shí),第三步就應(yīng)比較理論上的PH值與實(shí)際PH值,如果實(shí)際PH值低于理論P(yáng)H值,說明同時(shí)存在有代謝性酸中毒,反之,如果實(shí)際PH值高于理論P(yáng)H值,則說明同時(shí)有代謝性堿中毒。需注意,根據(jù)公式推算出來(lái)的PH值,可以有±0.02的波動(dòng)。
實(shí)例
例1:病人的PH值為7.58,PCO2為20mmHg,PO2為110mmHg。
分析:
第一步,PH值大于7.45,提示為堿中毒。
第二步,PCO2和PH值異向改變,表明為呼吸性。
第三步,PCO2降低20mmHg,PH值應(yīng)升高2×0.08(±0.02)即為7.56±0.02,與實(shí)際PH值相符,因此該病人為單純性呼吸性堿中毒。
結(jié)論:此病人為單純性呼吸性堿中毒。
例2:病人的PH值為7.16,PCO2為70mmHg,PO2為80mmHg。
分析:
第一步,PH值小于7.35,提示為酸中毒。
第二步,PCO2和PH值異向改變,表明為呼吸性。
第三步,PCO2增加30mmHg,PH值應(yīng)降低3×0.08(±0.02)即為7.16±0.02,而該病人的實(shí)際PH值恰好為7.16。
結(jié)論:此病人為單純性呼吸性酸中毒。
例3:病人的PH值為7.50,PCO2為50mmHg,PO2為100mmHg。
分析:
第一步,PH值大于7.45,提示為堿中毒。
第二步,PCO2和PH值同向改變,表明為代謝性。
第三步,不用,因該病人不是呼吸性酸堿平衡失調(diào)。
結(jié)論:此病人為代謝性堿中毒。